生物安全柜是在操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),用來保護(hù)操作人員、實(shí)驗(yàn)環(huán)境及實(shí)驗(yàn)材料,防止其暴露于實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的危險(xiǎn)性或潛在危險(xiǎn)性生物氣溶膠或?yàn)R出物的負(fù)壓通風(fēng)安全裝置。其廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、醫(yī)療衛(wèi)生、食品衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)測、基因工程、生物制品、疾病預(yù)防與控制等領(lǐng)域的科研、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)中,是微生物實(shí)驗(yàn)室的重要設(shè)備,也是防止實(shí)驗(yàn)室獲得性感染的主要設(shè)備,更是保障生物安全和環(huán)境安全的重要基礎(chǔ)。
生物安全柜的工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸,使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài),通過垂直氣流來保護(hù)工作人員,外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi),以避免處理樣品被污染;柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過HEPA過濾器過濾后再排放到大氣中,以保護(hù)環(huán)境。
根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異,生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三種類型:
一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品,一級(jí)生物安全柜本身無風(fēng)機(jī),依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流,由于不能對試驗(yàn)品或產(chǎn)品提供保護(hù),目前已較少使用;
二級(jí)生物安全柜是目前應(yīng)用最為廣泛的柜型。按照規(guī)定,二級(jí)生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)級(jí)別:A1 型,A2 型,B1型和B2 型。所有的二級(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護(hù);
三級(jí)生物安全柜是為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)而設(shè)計(jì)的,是目前世界上最高安全防護(hù)等級(jí)的安全柜。柜體完全氣密,100%全排放式,所有氣體不參與循環(huán),工作人員通過連接在柜體的手套進(jìn)行操作,俗稱手套箱,試驗(yàn)品通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染,適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)。
我們在開始工作以前,要記得清除生物安全柜內(nèi)表面的污染并進(jìn)行殺菌處理,操作時(shí)應(yīng)注意:
1.應(yīng)穿著個(gè)體防護(hù)服并戴手套防止被污染;
2.避免胳膊在前開口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出;
3.盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū);
4.在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作時(shí),不要進(jìn)行文字工作;
5.盡量減少操作者背后的人員活動(dòng);
6.禁止在生物安全柜內(nèi)使用明火;
7.一旦實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生溢灑物,用消毒紙巾置于其表面吸附清理;
8.從安全柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時(shí),一定要進(jìn)行表面消毒處理;
9.盡量使安全柜處于持續(xù)工作狀態(tài),并對所有物品進(jìn)行表面消毒處理,提供最大程度的人員保護(hù)。
使用完畢后的處理事項(xiàng)如下:
1.系緊用過的生物廢物袋;
2.對安全柜內(nèi)壁、后壁、工作臺(tái)面和前窗內(nèi)側(cè)進(jìn)行清潔和消毒處理;
3.由于剩余的培養(yǎng)基可能會(huì)使微生物生長繁殖,因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),包括儀器設(shè)備在內(nèi)的所有物品都應(yīng)清除表面污染,并移出安全柜;
4.從安全柜內(nèi)移出手臂之前,一定要進(jìn)行表面消毒處理,然后垂直于工作區(qū)開口緩慢地移出;
5.在每次使用后,要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺(tái)面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物。在每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺(tái)面、四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來清除表面的污染。在對目標(biāo)生物體有效時(shí),可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后,還必須用無菌水再次進(jìn)行擦拭;
6.關(guān)閉前操作窗口并開啟紫外燈。
對于生物安全柜的選擇,最基本取決于生物試驗(yàn)中所使用的試驗(yàn)品類型:
1.如果生物試驗(yàn)中只涉及微生物樣品,可以使用基本類型的生物安全柜。
2.如果生物試驗(yàn)中涉及微生物樣品與微量化學(xué)試劑(非腐蝕性),使用裝備外排管道的安全柜是必要的。
3.如果生物試驗(yàn)中涉及了細(xì)胞毒素類藥物,例如,各類癌癥治療藥物,必須使用的細(xì)胞毒素安全柜。
另外,需要提醒的是生物安全柜與通風(fēng)柜或超凈工作臺(tái)有著明確的區(qū)分,通風(fēng)柜和超凈工作臺(tái)不屬于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)過程中。
最后,生物安全柜最好每周采用空氣落菌數(shù)相似的方法進(jìn)行無菌檢查,每三個(gè)月更換一次過濾器,每年更換一次紫外燈。生物安全柜在移動(dòng)以及更換過濾器之前,必須清除污染,最常用的方法是采用甲醛熏蒸,應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來清除污染。