1. 準(zhǔn)備工作
設(shè)備檢查:在使用前,檢查組織包埋機(jī)的各項功能,包括溫度控制、加熱板、冷卻裝置等,確保設(shè)備正常運(yùn)行。
材料準(zhǔn)備:準(zhǔn)備好所需的材料,包括石蠟、組織樣本、包埋模具、切片刀等。
2. 組織樣本處理
固定:將取出的組織樣本放入固定液(如福爾馬林)中,固定時間一般為24小時,具體時間根據(jù)組織大小和類型而定。
脫水:將固定后的組織樣本依次浸泡在不同濃度的酒精溶液中(如70%、80%、90%、100%),每個濃度浸泡時間一般為1小時,以去除組織中的水分。
透明化:將脫水后的樣本放入透明劑(如二甲苯)中,通常浸泡2-3次,每次30分鐘,以去除酒精并使組織透明。
3. 包埋
熔化石蠟:將石蠟加熱至熔化狀態(tài),溫度一般在60℃左右。
浸泡:將透明化后的組織樣本放入熔化的石蠟中,浸泡30分鐘,確保組織完全被石蠟滲透。
模具準(zhǔn)備:準(zhǔn)備包埋模具,通常使用塑料或金屬模具,底部涂上一層石蠟以防粘連。
包埋:將浸泡過的組織樣本放入模具中,倒入熔化的石蠟,確保樣本完全被石蠟覆蓋??梢暂p輕敲打模具,去除氣泡。
冷卻:將模具放在冷卻板上,待石蠟?zāi)毯笕〕觥?/p>
4. 切片
切片機(jī)準(zhǔn)備:將包埋好的石蠟塊放入切片機(jī)中,調(diào)整切片厚度(一般為4-5微米)。
切片:使用切片刀進(jìn)行切割,確保切片均勻、完整。
貼片:將切好的切片貼在玻璃載玻片上,通常使用溫水或粘合劑。
5. 染色與觀察
染色:根據(jù)需要進(jìn)行組織切片的染色(如HE染色、免疫組化染色等)。
觀察:在顯微鏡下觀察切片,進(jìn)行病理診斷或研究。
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