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五分類血細(xì)胞分析儀檢測(cè)原理
發(fā)布時(shí)間:2022-10-18 08:57:47

正常情況下、外周血中,有形血細(xì)胞主要包括:

紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板三大類。

白細(xì)胞正常情況下又份為:有粒白細(xì)胞(中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞)和無(wú)粒細(xì)胞(淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞)。這樣白細(xì)胞就一共分出了五個(gè)類型,所以檢測(cè)這白細(xì)胞的五個(gè)類型的相應(yīng)血細(xì)胞分析儀就叫五份類血細(xì)胞分儀。

下面先看看各五種白細(xì)胞在正常情況下的細(xì)胞大小、細(xì)胞質(zhì)的多少、細(xì)胞核的形狀等物理結(jié)構(gòu)。

細(xì)胞直徑大小

細(xì)胞質(zhì)

細(xì)胞核

淋巴細(xì)胞

6-12微米

少、嗜堿性

大、圓

單核細(xì)胞

14-20微米

多、弱嗜堿性

卵圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則形

嗜中性粒細(xì)胞N

10-12微米

細(xì)小均勻的嗜中性顆粒

桿狀或分2-5葉、以3葉為主

嗜酸性粒細(xì)胞E

12-15微米

大小一致、分布均勻的嗜酸性顆粒

常分2葉

嗜堿性粒細(xì)胞B

10-12微米

大小不一、分布不均的嗜堿性顆粒

不規(guī)則、呈分葉狀或S形

那么這五個(gè)類型的白細(xì)胞是根據(jù)什么原理來(lái)分類的呢?

目前主要是根據(jù)細(xì)胞的如下幾個(gè)特性來(lái)分類:細(xì)胞的大小、核漿比例、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的復(fù)雜程度、細(xì)胞核所含核酸的多少以及對(duì)某些化學(xué)試劑(或/和)熒光染液的敏感程度來(lái)區(qū)分之。

根據(jù)白細(xì)胞的以上特性,不同廠家、不同型號(hào)的五份類血細(xì)胞分析儀其檢測(cè)分析的原理是不同的。但其最基本的原理目前無(wú)非就以下幾種情況:

1、利用這五類細(xì)胞對(duì)不同化學(xué)試劑(溶血?jiǎng)┗蚪腥苎兀┑娜芙庑再|(zhì)不同(如嗜酸細(xì)胞試劑和嗜堿細(xì)胞試劑)以及結(jié)合白細(xì)胞直方圖細(xì)胞三分群的庫(kù)爾特(電阻抗法)檢測(cè)原理將白細(xì)胞分為五類。

例如:

    早期的Abcus?。剩酰睿椋铮颍祪x器,(行業(yè)內(nèi)常稱為假五分類),當(dāng)然比起三分群的儀器分類精準(zhǔn)了不少,但還是存在很大偏差,因?yàn)橛行┘?xì)胞是采用大小分群(即脈沖的大?。┖陀?jì)算出來(lái)的。

2、四角度照射法:

?。梗啊憬菂^(qū)分分葉核細(xì)胞和單核細(xì)胞得到兩類:

中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞(分葉核細(xì)胞);

單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞(單核的嗜堿性粒細(xì)胞)。

    用90°偏振區(qū)分:

嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。

    用0°和10°通過(guò)核質(zhì)比及細(xì)胞大小,將嗜堿性粒細(xì)胞從淋巴和單核細(xì)胞中群中分開(kāi)。

    用0°根據(jù)大小區(qū)分單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。

   此類儀器以優(yōu)利特生產(chǎn)的URIT5160五分類為代表。

3、細(xì)胞化學(xué)-體積法:化學(xué)性溶血?jiǎng)┮环矫孀饔糜诩t細(xì)胞使紅細(xì)胞破壞釋放血紅蛋白,另一方面還作用于白細(xì)胞,使白細(xì)胞膜表面產(chǎn)生小孔,細(xì)胞內(nèi)漿質(zhì)外溢,細(xì)胞失水皺縮,細(xì)胞膜緊貼于核上。測(cè)定時(shí)細(xì)胞的體積大小是核、顆粒和膜成分的總和,白細(xì)胞種類不同、分化程度不同所含的胞漿顆粒、核結(jié)構(gòu)以及大小也不同。運(yùn)用V.C.S三種探針,在流式通道的某一位點(diǎn),對(duì)通過(guò)的單列白細(xì)胞,進(jìn)行逐個(gè)的、同時(shí)的、三重的檢測(cè),以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。

V-低頻波(Volume):      采用低頻電流準(zhǔn)確分析細(xì)胞體積;

C-高頻波(Conductivity):   采樣高頻電流分析細(xì)胞核型;

S-激    光(Scatter):   該激光束可穿透細(xì)胞,探測(cè)細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和胞漿中顆粒情況,分析細(xì)胞的顆粒特性。

此類儀器以貝克曼庫(kù)爾特為代表的LH750

4、利用半導(dǎo)體激光散射和核酸熒光染色技術(shù)

    前向散射光:檢測(cè)細(xì)胞的大小;

    側(cè)向散射光:檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度;

    側(cè)向熒光:  檢測(cè)細(xì)胞核酸的多少。

    利用這三個(gè)參數(shù)將白細(xì)胞分為五類。

此設(shè)備原理是目前較為流行的測(cè)量方法,以SYSMEX的五份類為代表,代表機(jī)型有XN等系列。

  以上這些分類方法還都在圍繞細(xì)胞的物理結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)上分析,并未對(duì)細(xì)胞進(jìn)行功能性質(zhì)和生理機(jī)制的分類,筆者相信,在不遠(yuǎn)的將來(lái)將有一次革命性的大突破。因?yàn)榕R床上更喜歡細(xì)胞的功能性質(zhì)及異常細(xì)胞的分析分類,這樣的檢測(cè)結(jié)果其臨床價(jià)值及臨床意義會(huì)更大,這是趨勢(shì)!

就目前現(xiàn)狀來(lái)看、目前最經(jīng)典的方法當(dāng)然還是手工制片染色利用顯微鏡人工觀察分類,這才是金標(biāo)準(zhǔn),但這一方法要求檢驗(yàn)人員的細(xì)胞形態(tài)學(xué)的基本功要過(guò)硬,這就無(wú)疑要求檢驗(yàn)人員不斷學(xué)習(xí),熟練掌握反復(fù)鍛煉對(duì)形態(tài)的觀察和辨別能力。對(duì)儀器檢測(cè)結(jié)果的異常報(bào)警提示要負(fù)責(zé)任的進(jìn)行人工復(fù)檢,以防漏檢、耽誤臨床的確診及延誤患者的治療。

注意事項(xiàng):

  ?。?、由于在病理情況下(白血病、貧血等),有核紅細(xì)胞的存在,使得白細(xì)胞總數(shù)異常升高,在有些儀器中,根據(jù)測(cè)量的有核紅細(xì)胞百分比,從白細(xì)胞中已扣除;但有些儀器沒(méi)有扣除,所以用戶一定要清楚自己使用的儀器性能有無(wú)從白細(xì)胞總數(shù)中扣除有核紅細(xì)胞的功能,如果沒(méi)有此功能要手工推片染色人工顯微鏡下分類,按有核紅細(xì)胞的百分比例從白細(xì)胞總數(shù)中扣除之,這一點(diǎn)一定要明確的寫在實(shí)驗(yàn)室的SOP文件中。

   ?。?、高端精準(zhǔn)的檢測(cè)設(shè)備當(dāng)然對(duì)臨床診斷疾病大有幫助,但設(shè)備和耗材的價(jià)格也相當(dāng)昂貴,一份價(jià)格一份貨??!我國(guó)地域遼闊,各地區(qū)、各醫(yī)院的經(jīng)濟(jì)狀況發(fā)展不均衡,所以我們一概的不能追求高大上,要根據(jù)當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)情況、政府財(cái)政資助和老百姓的經(jīng)濟(jì)收入綜合考慮,選擇適合貴院的相應(yīng)設(shè)備。

(文章來(lái)源于互聯(lián)網(wǎng))


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