電泳儀是實(shí)現(xiàn)電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動,不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運(yùn)動速度不同,據(jù)此可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個(gè)組分提取制備。
電泳儀的工作原理
在溶液中能吸附帶電質(zhì)點(diǎn)或本身帶有可解離基團(tuán)的物質(zhì)顆粒,如蛋白質(zhì)、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場中必然會受到電性相反的電極吸引而發(fā)生移動。
不同物質(zhì)的顆粒在電場中的移動速度除與其帶電狀態(tài)和電場強(qiáng)度有關(guān)外,還與顆粒的大小、形狀和介質(zhì)黏度有關(guān)。
根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個(gè)組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。
電泳儀的分類
全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀
具有熒光/可見光雙系統(tǒng),使用熒光試劑項(xiàng)目如CK、LD同工酶。優(yōu)點(diǎn)靈敏度、準(zhǔn)確度高且采用高壓、低溫系統(tǒng),速度非常快。
全自動醋纖膜電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用醋纖膜電泳片,優(yōu)點(diǎn)為自動化程度更高。多用于臨床常規(guī)血清蛋白電泳分析。
全自動瓊脂糖電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優(yōu)點(diǎn)為靈敏度高,可用于低濃度蛋白檢驗(yàn),如尿蛋白及腦脊液蛋白,同工酶的分離效果也相當(dāng)不錯(cuò),所能做項(xiàng)目較多且靈敏度較高。
全自動電泳分析系統(tǒng)
該電泳儀集中了上述儀器的優(yōu)點(diǎn),自動點(diǎn)樣、電泳、呈色、烘干??捎酶鞣N電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統(tǒng),是一種較理想的電泳儀。
電泳儀的使用方法
1、首先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。
2、電泳儀電源開關(guān)調(diào)至關(guān)的位置,電壓旋鈕轉(zhuǎn)到最小,根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。
3、接通電源,緩緩旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)鈕直到達(dá)到的所需電壓為止,設(shè)定電泳終止時(shí)間,此時(shí)電泳即開始進(jìn)行。
4、工作完畢后,應(yīng)將各旋鈕、開關(guān)旋至零位或關(guān)閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。
如何選購電泳儀
1、要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)規(guī)格型號的電泳儀,才能確保經(jīng)濟(jì)、耐用、簡單、合理。
2、目前市面上的電泳儀電源,按電壓分為高壓1500~5000V、中壓500~1500V、低壓500V三種。
3、從電壓的角度來看,用于核酸(瓊脂糖)水平電泳、PCR電泳、DNA回收、印跡轉(zhuǎn)移等實(shí)驗(yàn)只需最高電壓300V。
4、輸出的所有參數(shù)根據(jù)其型號的不同都有一個(gè)特定的工作范圍,如果實(shí)際需要超過這一范圍,就應(yīng)當(dāng)選擇能夠滿足使用的另外型號的電泳儀電源。
5、用戶如果需要一臺電泳儀電源帶幾個(gè)電泳槽工作時(shí),首先要確定總電流不要超過儀器的最大范圍。
電泳儀的注意事項(xiàng)
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2、儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3、由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4、在總電流不超過儀器額定電流時(shí),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
6、使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。
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